1 材料与方法
1.1 中草药
1.2 主要试剂及仪器
1.3 供试细菌和病毒
1.4 中草药提取
1.5 体外抑菌试验
1.5.1 菌悬液制备
1.5.2 体外抑菌活性的测定
1.6 体外抗PRRSV试验
1.6.1 复方中草药对Marc-145细胞最大安全浓度的测定
1.6.2 病毒半数组织培养感染剂量的测定
1.6.3 中草药对病毒吸附细胞的阻断作用
1.6.4 中草药对病毒合成复制的抑制作用
1.6.5 中草药对病毒的直接杀灭作用
1.6.6 实时荧光定量RT-PCR检测
2 结 果
2.1 4种复方中草药的体外抑菌活性
2.2 4种复方中草药在Marc-145细胞上的最大安全浓度
2.3 PRRSV的TCID50
2.4 4种复方中草药的抗病毒试验
3 讨 论
4 结 论
文章摘要:【目的】探索泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散4种清热解毒复方中草药体外抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的效果,为临床应用提供参考。【方法】采用传统水煎法对4种复方中草药进行提取,通过二倍稀释法测定中药对大肠杆菌标准菌ATCC 259222和金黄色葡萄球菌标准菌ATCC 25923的体外抑菌活性;在测定复方中草药对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上,通过实时荧光定量PCR鉴定复方中草药对PRRSV的抑制作用。【结果】泻心汤对大肠杆菌的体外抑菌活性最好,其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)均为7.81 mg/mL;三黄虎杖汤和黄连解毒汤次之,其MIC和MBC为31.25~125 mg/mL;清瘟败毒散抑制大肠杆菌效果较差:MIC和MBC均>250 mg/mL,而金黄色葡萄球菌对泻心汤、黄连解毒汤和三黄虎杖汤非常敏感,其MIC和MBC为0.24~0.98 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中,泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散对Marc-145细胞最大安全浓度分别为0.49、0.49、3.90和1.95 mg/mL。4种复方中草药对PRRSV的抑制与直接灭活作用较好,黄连解毒汤和清瘟败毒散均在0.98 mg/mL时对PRRSV有阻断作用,泻心汤和三黄虎杖汤在0.24和0.12 mg/mL时对PRRSV有阻断效果。【结论】4种复方中草药中泻心汤的体外抑菌及抗PRRSV的效果最好,其次是三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散,4种清热解毒复方均有一定的抑菌和抗病毒活性,可以为临床应用提供参考依据。
文章关键词:
论文DOI:10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.02.037
论文分类号:S853.74
文章来源:《今日畜牧兽医》 网址: http://www.jrcmsy.cn/qikandaodu/2022/0127/1026.html
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